细胞划痕
服务原理 :
肿瘤细胞在体外仍具有迁移的能力。细胞划痕法是测定了肿瘤细胞的运动特性的方法之一。其借鉴体外细胞致伤愈合实验模型,在体外培养的单层细胞上,划痕致伤,然后比较不同实验组中肿瘤细胞迁移的能力。
服务流程:
1.细胞培养;
2.;
3.无血清/低血清培养;
4.显微镜观察拍照;
5.计算迁移率。
实验步骤 :
实验共分以下4个主要步骤:
1. 质粒转染细胞:
准备A549细胞,转染前一天按照70-80%密度铺在6cm培养皿中。16h后,按照转染试剂说明书转染细胞(8μg质粒,20μL lipofectamine 2000转染试剂) 。转染24h后,重新铺盘,密度为30-40%。
2. 划线;
待细胞*贴壁后,用200μL tip轻轻划线,垂直90度,用力均匀,确保划线处无细胞。
3. 细胞培养及拍照;
每隔3天换一次新鲜培养基。连续几天倒置显微镜下100X下拍照,记录细胞的迁移情况,直到细胞填满划痕处。
4. 统计分析。
划线两侧间距为average gaps(AGs),使用Image-Pro Plus软件分析各组细胞的AGs。
收费标准/服务周期/提供结果:
详谈,我们会根据您的方案及需求制定详细的服务协议。
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