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浅谈原位杂交在分子细胞遗传学有什么重要的?

更新时间:2017-11-20 点击次数:1783次
   原位杂交是在分子生物学领域应用极为广泛的实验技术之一,是在研究生物体发育过程中的一种极为重要的分子遗传学的研究方法。原位杂交结合成专一的核酸杂交分子,经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的核酸序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物。
  
  原位杂交能在成分复杂的组织中进行单一细胞的研究而不受同一组织中其他成分的影响,因此对于那些细胞数量少且散在于其他组织中的细胞内DNA或RNA研究更为方便;同时由于原位杂交不需要从组织中提取核酸,对于组织中含量极低的靶序列有*的敏感性,并可完整地保持组织与细胞的形态,更能准确地反映出组织细胞的相互关系及功能状态。
  
  荧光原位杂交技术是一种非常有用的分子细胞遗传学工具,特别原位杂交是对一些染色体数目异常和复杂染色体异常的诊断,架起了染色体显带技术和分子遗传学之间的桥梁。本文主要就荧光原位杂交技术的发展历程、探针制备和临床应用做一简单的综述。
  
  在细胞遗传学,分子生物学和免疫学相结合基础上发展的一种新科学,他利用已知的核酸序列作为探针,以荧光素直接标记或以非放射性物质标记后与靶DNA结合,在通过荧光素标记,zui后在荧光显微镜下观察杂交信号,从而对标本中的待测核苷酸进行定性,定位和定量分析。
  
  原位杂交利用DNA变性后双链解开变成单链,在事宜的温度和离子强度下可以退火和互补DNA链形成异源双链的原理。