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荧光定量PCR板该如何使用

更新时间:2022-11-25 点击次数:771次
  荧光定量PCR主要由样品载台、基因扩增热循环组件、微量荧光检测光学系统、微电路控制系统、计算机及应用软件组成。其中基因扩增热循环组件工作原理与传统基因扩增仪大致相同,不同厂家不同型号的产品分别采用空气加热、压缩机制冷、半导体加热制冷等工作方式。微量荧光检测系统由荧光激发光学部件、微量荧光检测部件、光路、控制系统组成。
 
  荧光定量PCR是指在PCR扩增反应体系中加入荧光基团,通过对扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。具有灵敏度高,特异性强,能实现多重反应,据实时性和准确性等特点,广泛应用于分子生物学研究和医学研究等领域。
 
  PCR板有透明和乳白色可选,其中乳白色更适合用于顶部采集荧光信号的新型荧光定量PCR,但如果荧光定量PCR仪是底部光源的,则应选择透明的。
 
  PCR板根据裙边设计又可分为无裙边、半裙边和全裙边三种设计模式,不同厂家的荧光定量PCR会设计不同的切角或边缘凸起,请选择适合该PCR仪的板子。
 
  PCR板又分100ul体积(矮板)和200ul体积(高板),根据机型的不同选择,选择不同高度孔板,避免高度错误对机器造成破坏和加热不均导致数据失真。
 
  当使用96孔板做荧光定量PCR实验的时候,推荐使用光学膜代来密封反应孔。正确的封膜方法是:先沿着96孔板的纵向压膜,然后横向,最后沿着板的边缘按压使之密封。
 
  加样后会在管壁上飞溅一些小液滴,另外反应体系内也会有一些气泡,需要离心去掉挂壁液滴和气泡。请使用专用的微孔板离心机解决上述问题。
 
  PCR板属于一次性消耗品,生产一次成型,不建议剪开使用容易造成实验误差增加,不能清洗或部分重复利用。不要为了节省一点小钱,而给实验带来后续分析上的困扰。