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细胞凋亡检测的检测优势有哪几点呢

更新时间:2021-07-15 点击次数:1389次
  细胞凋亡检测是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。形态学检测是研究细胞凋亡的基本方法。细胞凋亡的形态学变化是多阶段的,起初,细胞间连接和微绒毛消失,细胞体积缩小,胞浆凝缩,内质网变疏松并与胞膜融合,形成一个个空泡,核糖体与线粒体等细胞器聚集,结构尚无明显改变,细胞核内的染色质逐渐凝聚成新月状附在核膜周边,细胞核固缩呈均一的致密物,进而断裂成碎块,此时细胞膜仍保持完整:然后,胞膜及核膜不断出芽、脱落,一个细胞变成数个大小不等的有膜包裹的凋亡小体:最后凋亡小体被周围具有吞噬能力的细胞吞噬、消化。上述这些形态学的变化,可以通过本试剂盒中的染色及光学显微镜观察。
 
  选择性结合磷脂酰丝氨酸。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧,即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期,不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面,即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而AnnexinV和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。
 
  细胞凋亡检测用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的AnnexinV,即AnnexinV-FITC,就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。本试剂盒还提供了碘化丙啶(PropidiumIodide,PI)染色液,碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞,呈现红色荧光。对于坏死细胞,由于细胞膜的完整性已经丧失,AnnexinV-FITC可以进入到细胞浆内,与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合,从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。
 
  细胞凋亡检测的检测优势
 
  1.灵敏度高,背景干扰小;
 
  2.可在组织及单细胞中检测低水平凋亡;
 
  3.后续进行流式、荧光显微镜检测,对细胞凋亡进行定量;如联合使用耦合显色酶的抗荧光素抗体,能将荧光信号转化为比色信号,用光学显微镜进行检测。