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讲讲人膀胱癌阿霉素耐药株该怎么接种
更新时间:2018-01-25 点击次数:1089次
   人膀胱癌阿霉素耐药株所有肿瘤和病毒转染的细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需高压灭菌后方能丢弃。收到细胞后,在倒置镜下观察整个细胞生长情况。
  
  人膀胱癌阿霉素耐药株的传代其操作步骤如下(斜面接种法):
  
  (1)从冰箱冷藏室中取出菌种斜面后,应在室温放置约30分钟。
  
  (2)将装有新鲜配制的培养基菌种保藏管管壁上注明菌名及接种日期,和传代菌种一并移入洁净工作台,打开紫外灯照射一小时。
  
  (3)关闭紫外灯。点燃酒精灯,左手握住人膀胱癌阿霉素耐药株斜面,将管口靠近火焰上方,右手拿接种棒后端,将接种环烧红约30秒,随后将接种棒金属部分在火焰上烧灼,往返通过三次。
  
  (4)右手用无名指、小指及掌部夹住管塞,左手将管口在火焰上旋转烧灼,右手再轻轻拔开管塞,将接种环伸入管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下,稍冷后再至菌苔上,刮取少量菌苔,随即取出接种棒并将菌种管口移至火焰上方。
  
  (5)塞上管塞,左手将人膀胱癌阿霉素耐药株放下,取营养琼脂斜面一支,照上述操作打开管塞,将接种环伸入管内至琼脂斜面的底部向上划一条直线,然后从底部向上作连续曲线划线,一直划到斜面顶端,使细菌接种在斜面的表面上。
  
  (6)取出接种环,在火焰上方将培养基管盖上塞子,然后将接种过细菌的接种环在火焰上烧灼灭菌。
  
  (7)将已接种好的细菌管置30~35℃细菌培养箱培养22~24h,真菌管置23~28℃真菌培养箱zui多培养7天。
  
  当工作用人膀胱癌阿霉素耐药株传代代数小于5时,可直接用上一代工作用菌种转接下一代工作用菌种,如:(W3)可直接转接为(W4)。按上述程序操作,直至(W4)转为(W5)为止,需重新接种,旧的工作菌种进行销毁。